沙棘粉對衰老模型小鼠腦組織MDA和GSH含量的影響及其抗疲勞效果的研究.docx

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【摘要】 采用昆明小鼠為實驗對象,通過飼喂不同比例的沙棘粉飼料4周以后,在抗疲勞實驗中,以血清乳酸脫氫酶(LDH)活力、血乳酸(BLA)、肌糖原(MG)、肝糖原(LG)等4個生理參數為指標察看沙棘粉的抗疲勞效應,結果說明,飼喂4周沙棘粉劑的小鼠,其LDH、LG含量均顯著高于對照組;其抗疲勞時間亦顯著增長,且抗疲勞實驗30min和60min后的血乳酸水平均低于對照組。在檢測小鼠腦組織的MDA和GSH含量時發現4%~6%劑量沙棘粉能降低MDA含量,提高GSH含量,說明沙棘粉能拮抗D-半乳糖的損傷,到達維生素相同效果。
   
   【關鍵詞】 沙棘粉;衰老小鼠;腦組織氧化復原物質;抗疲勞效果
   
   沙棘制品不僅可以作為餌料中的維生素源,還可制成供人類食用的產品。沙棘果享有“維生素倉庫〞和“神秘果〞之稱,沙棘果中含有豐盛的生物活性物質,具有祛痰、利肺、養胃、健脾等成效,對心血管系統、免疫系統、抗腫瘤、抗衰老、抗炎、抗輻射損傷等方面均有顯著的藥理效應[1]?？梢灶A見,沙棘制品的市場前景十分可觀,而目前我國沙棘資源浪費嚴重。因此開發利用此資源已迫在眉睫。西部地區政府及種植戶迫切希望高等學校、科研院所發展沙棘資源開發利用的研究,本實驗采用沙棘果的干粉作為實驗材料,通過飼喂昆明鼠4周以后,進行其抗疲勞效果的研究,為沙棘資源開發利用提供根底性實驗參數。
   
   1 材料與辦法
   
    動物來源及實驗場所 實驗動物選自南京安立默實驗動物繁殖調劑中心〔許可證號SYXK2022-0059〕,在分組前選用了出生日齡〔4周齡〕及體重都根本相同的昆明小鼠〔雄性〕;實驗場所為南京大學藥業有限公司動物房〔許可證號SCXK2022-0016〕。
   
    實驗分組 取小白鼠147只,隨機分成7個大組,每組均為21只,組1作為飼喂添加復合維生素的對照組,組2作為飼喂無復合維生素飼料的空白對照組,組3~組7作為飼喂添加比例不同的沙棘粉飼料實驗組,小鼠均單籠飼養4周。
   
    飼喂劑量及配方 每日投喂足量飼料和水,各組飼料配方如表1。
表1 各組配方成分表 〔%〕 
    LDH活力、BLA、MG、LG含量測試 抗疲勞實驗前,從每組取小鼠3只,眼眶放血制血清送檢,測試乳酸脫氫酶〔LDH〕活力、肌糖原〔MG〕和肝糖原〔LG〕,LDH活力,參數King氏法測定[2]。
   
    抗疲勞實驗 抗疲勞試驗依陳奇辦法[3],將飼喂4周的小組分別取12只按小鼠體重10%負重砝碼,于水溫25~27℃、40cm深、直徑為20cm的標本瓶中游泳,進行抗疲勞試驗。待其頭部沒入水下5秒時迅速撈起,記錄游泳時間,待其恢復30min后各取6只眼眶放血,制備血清,待送檢測試BLA,各組殘余6只待其恢復60min后再眼眶放血,制血漿送檢測試BLA。
    
   考慮到在對每一只鼠的每一次取血操作時,對動物造成不同程度傷害性刺激,由此引起的抗疲勞強度無法保持一致,故而設計成每一個實驗測定都分批取樣,進行一次性采血。
   
    小鼠腦組織MDA、GSH含量 取飼喂4周的小鼠,每組6只,斷頸處死,迅速取出大腦,用冰冷的PBS緩沖液制備10%腦勻漿,離心后取上清液進行MDA和GSH含量測定。測定步驟按試劑盒表明書進行,MDA、GSH測定試劑盒由南京建成生物項目研究所提供。
   
   2 結果
   
    飼喂4周后各組小鼠LDH活力、MG、LG與BLA值 見表2。飼喂4周后各組小鼠血液指標初始值,各組取6只小鼠眼眶測試MG、LG、BLA和LDH,因這批動物取自抗疲勞動物之前,故稱為初始數值,表2為測試結果。
表2 各組小鼠LDH活力、MG、LG與BLA初始值 (x±s)
注:表中不同組的相同指標中,*表示差別有顯著性;**表示差別有非常顯著性
   由表2統計分析結果可知,g3~g5沙棘粉組的小白鼠,其MG和LG含量均顯著大于空白組( 抗疲勞及血乳酸指標 各組隨機取12只鼠,做抗疲勞實驗,于其休息30min、60min兩個階段各取6只放血制血清測試BLA含量,各組的實驗數據進行均數差顯著性檢驗,統計結果見表3。
表3 抗疲勞時間、30min與60min的BLA數值及其均數差檢驗 (x±s)
注:*表示差別有顯著性;**表示差別有非常顯著性
由表3測試結果可推算:飼喂2%~6%~,且差別有非常顯著性〔PPP
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    血乳酸變異級差及其恢復速度 由于各組抗疲勞運動前的血乳酸含量初始值不同,故僅僅使用抗疲勞后30min和60min的血乳酸含量差別性還缺乏以表明動物在疲勞運動后乳酸去除速度大小,因此依據表3與表2可推算各組血乳酸變異級差和恢復速度,見表4。表4 抗疲勞后30min與60min血乳酸BLA濃度變異級差和恢復速度
 注:BLA濃度變異級差:Bt-B0;恢復速度:(Bt2-Bt1)/(t2-t1)
    各組小鼠腦組織MDA、GSH含量 灌喂沙棘油后各組小鼠腦組織MDA、GSH含量變化見表5。
表5 灌喂沙棘油各組小鼠腦組織GSH及MDA含量 (x±s)
注:*表示差別有顯著性;**表示差別有非常顯著性
由表5可以看出,維生素組中,GSH的升高以及MDA的下降相對于空白組都有極其顯著的變化〔P3 討論
由文鏡等的研究[4]可知,動物疲勞后的BLA降低取決于LDH活力,肌糖原和肝糖原是運動能源。從表2可以看到,服用沙棘粉可以提高體內糖原含量,從而使機體抗疲勞能力增強。在初始條件下,LDH活力及肌糖原和肝糖原的測試結果說明,2%~6%沙棘粉在提高小鼠的LDH活力、肌糖原和肝糖原方面與復合維生素的效果差別無顯著性;從而也可表明飼喂適當劑量沙棘粉的抗疲勞效果與復合維生素差別無顯著性。表3結果說明:飼喂2%~6%沙棘粉劑量的小白鼠抗疲勞時間比對照組長,與飼喂復合維生素組的效果差別無顯著性,說明沙棘對提高小白鼠抗疲勞具有一定效果。劑量在8%~10%時效果不明顯,可能為沙棘粉含量較高導致玉米粉含量下降引起。表4的推算結果那么可以表明疲勞后的2%~6%沙棘粉組BLA下降比對照組快。由表5統計分析可得,飼喂4%~6%沙棘粉及維生素的小白鼠腦組織GSH含量顯著高于對照組,MDA含量顯著低于對照組。表明沙棘粉對衰老小鼠具有抗衰老作用。
沙棘是目前學術界發現的唯一能把經濟效益、生態效益和社會效益集注于一身的作物,沙棘資源的開發利用研究正日益受到重視。在國際上,那些沒有野生沙棘資源分布的國家,如加拿大、美國、日本、南非等國,近年來對沙棘的研究也十分關注[5]。目前沙棘的開發產品主要為沙棘油,其保健功能研究正在被應用于醫學、保健食品、化裝品、航空航天醫學等領域。沙棘油占沙棘果實的2%~5%,且提煉復雜,相比而言,沙棘汁占沙棘果的70%以上,在生產沙棘油過程中,許多豐盛的營養成分及生理活性物質也富集于沙棘汁中。本實驗充沛的證明,適當劑量的沙棘粉能夠對動物體產生一定抗疲勞的作用和抗衰老的作用。因此,未來對沙棘的利用可以不再單單拘泥于沙棘油,沙棘的利用率也能得到大大的提高。我國沙棘總面積居世界各國之首,占世界沙棘總面積的95%[6]。如何開發利用如此豐盛的沙棘資源用于造福人類健康生活仍需要進一步地探索和研究。
【參考文獻】
   1 ,2022,14(1):22-24.
   
   2 ,1959,16-295.
   
   3 :人民衛生出版社,1994,624-625.
   
   4 文鏡,陳文,,1993,15(1):79-82.
   
   5 ,2022,14(1):25-30.
   
   6 ,1989,9-11.
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